第一代試劑
1985年3月，美國食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)了第一個HIV抗體篩查試劑并將其應(yīng)用于獻(xiàn)血員的篩查，該試劑即為第一代HIV診斷試劑。第一代HIV診斷試劑原理為間接ELISA法，所用的包被抗原為體外培養(yǎng)的HIV裂解物，這種病毒裂解物中不僅含有很多雜抗原，而且所含的主要HIV結(jié)構(gòu)和表達(dá)蛋白濃度不能保證，并且天然的結(jié)構(gòu)和表達(dá)蛋白上含有很多交叉抗原表位，因而，靈敏度和特異性不高，出現(xiàn)許多假陰性和假陽性。盡管如此，第一代HIV診斷試劑的出現(xiàn)仍然是一個劃時代的改變，其有效阻斷了HIV通過血液的傳播。
第二代試劑
隨著基因工程技術(shù)迅速發(fā)展，1990年5月第二代使用基因重組或合成多肽抗原的HIV診斷試劑面試。雖然仍然是利用間接酶聯(lián)免疫法原理，但第二代診斷試劑窗口期比第一代診斷試劑縮短了約20天，靈敏度和特異性也有所提高。同時由于第一代試劑只含有HIV-1抗原，而HIV-1抗原與HIV-2抗原的核苷酸序列相差40%，因此檢測HIV-1抗體的試劑對HIV-2抗體陽性的標(biāo)本靈敏度較低，常發(fā)生漏檢，針對此種情況第二代診斷試劑中出現(xiàn)了HIV-1/HIV-2抗體診斷試劑盒，這種試劑盒在包被的抗原中又加入了HIV-2抗原（gp36多肽），使得在一次試驗中可同時檢測HIV-1和HIV-2抗體，既節(jié)約了時間和人力，又節(jié)約了成本。第二代試劑與第一代相比，特異性有明顯的提高。
第三代試劑
1994年出現(xiàn)的第三代HIV診斷試劑一改過去間接法檢測原理，利用雙抗原夾心法檢測標(biāo)本中的抗體，酶標(biāo)記物也由抗人lgG抗體（即第二抗體）改為特異性HIV抗原。此外，在非洲喀麥隆發(fā)現(xiàn)了HIV-1 O群后，研究者以HIV-1/HIV-2抗體試劑檢測HIV-1 O群標(biāo)本時發(fā)現(xiàn)常出現(xiàn)假陰性，因此又在試劑中加入HIV-1 O群抗原（gp41多肽）。因此第三代試劑靈敏度提高，窗口期進(jìn)一步縮小，是國際上公認(rèn)的較好檢測抗體模式，也是目前國際和國內(nèi)市場上的主流產(chǎn)品，常被視為金標(biāo)準(zhǔn)。目前我國國產(chǎn)第三代HIV診斷試劑盒在靈敏度、特異性方面已達(dá)到國際先進(jìn)水平。
第四代試劑
第四代HIV診斷試劑是一種HIV-1/HIV-2抗體與HIV-1 O亞群抗體及p24抗原的聯(lián)合檢測方法。這種試劑省去p24抗體檢測而增加了p24抗原檢測，并不影響HIV抗體的檢測。在對第四代試劑的研究中發(fā)現(xiàn)p24抗原滴度降低與血清陽轉(zhuǎn)過程中未降低S/CO值，也沒有發(fā)現(xiàn)第四代試劑檢測陰性而第三代試劑檢測為陽性的樣本，所以未在p24抗原血癥和血清抗體陽性轉(zhuǎn)之間引入診斷的第2個窗口期。第四代由于可同時檢測抗原和抗體，未完善的HIV感染的篩查試劑，因而，獻(xiàn)血員篩查時，建議用第四代試劑進(jìn)行檢測，以盡量提高輸血的安全性。
金標(biāo)層析法（快速法）
試紙條是采用免疫層析技術(shù)研制的新一代檢測試劑，可檢測血清或血漿標(biāo)本中的HIV-1/2特異性抗體。整個操作時間僅需15分鐘，操作簡便、快速、準(zhǔn)確、自帶質(zhì)控對照、不需任何附加試劑。適用于臨床檢驗、無償獻(xiàn)血現(xiàn)場篩查等。其原理是：在硝酸纖維素膜上的檢測區(qū)包被基因重組的 HIV--1+2 抗原，在對照區(qū)包被抗 HIV 抗原單克隆抗體。檢測時樣品中的抗 HIV 抗體與標(biāo)記膠體金的基因重組 HIV--1+2 抗原形成Ag-Au復(fù)合物，由于層析作用，復(fù)合物沿膜帶移動，可與包被的基因重組 HIV--1+2 抗原形成雙抗原夾心免疫復(fù)合物。如為陽性樣品，則可分別在檢測區(qū)和對照區(qū)各凝集形成一條紅色線，如為陰性樣品，則只在對照區(qū)形成一條紅色線。
- 上一篇：HIV抗體檢測必須空腹嗎
- 下一篇：艾滋病病毒對人體細(xì)胞的影響
